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出典(authority):フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』「2015/10/19 22:43:27」(JST)

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免疫沈降法（めんえきちんこうほう）とは、免疫沈降反応（可溶性の抗原と抗体が特異的に反応して不溶化し沈殿する反応）を利用して抗原を検出・分離・精製する、生化学の実験手法のこと。実験室では免疫沈降という略称で呼ばれることもある。

概要と原理

基質と抗体を多数架橋させることで、大きな構造体として不溶化させる。通常は抗体をセファロースビーズなどの担体に結合させ、より沈殿しやすくする。最近ではプロテインAやプロテインGを結合させた超常磁性の磁気ビーズを使用する方法もよく行われる。磁気ビーズ法では多孔性のセファロースやアガロースと比べてバックグラウンドを低く抑えられ、短時間での実験が可能。モノクローナル抗体よりもポリクローナル抗体の方が免疫沈降を行いやすい。試料を比較的穏和な条件で処理でき、目的の基質に結合する因子の特定などに用いられる他、タンパク質の精製などにも用いられる。

手法

サンプルに特異性のない抗体（使用する場合は担体も）を混ぜ、遠心分離によって非特異的に吸着する成分を取り除く。上清に適当な濃度の特異性のある抗体を混ぜ、遠心分離で沈殿を回収する。沈殿を適当なバッファーで洗浄する。特異性が高く力価の高い抗体を用いれば比較的容易にできる。抗体の品質がポイントになることが多い。磁気ビーズ法では担体に磁気ビーズを使用し、遠心分離の代わりに磁石による分離を行う。遠心分離に比べて穏やかな条件下で分離精製ができ、夾雑物の少ないデータが得られることが多い。

タンパク質間相互作用検出への応用

免疫沈降法によって、目的のタンパク質と相互作用する（特異的に複合体を形成する）別のタンパク質との複合体を回収する方法が、共免疫沈降法（Co-immunoprecipitation：Co-IP）である。

さらにこれの応用として、あらかじめ目的タンパク質にタグを付けておき、タグとの結合を利用してこのような複合体を回収する方法もあり、プルダウン法（Pull-down assay）と呼ばれる（ただしタグ認識のために、抗体に限らずその他の特異的結合－例えばHisタグとニッケルキレート、GSTタグとグルタチオン、アビジンとビオチン等－を用いる方法もある）。

UpToDate Contents

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1. 遺伝学およびゲノミクスのためのツール：モデルシステム tools for genetics and genomics model systems
2. ヒトヘルペスウイルス8感染の診断および抗ウイルス療法 diagnosis and antiviral therapy of human herpesvirus 8 infection
3. 腫瘍随伴性天疱瘡 paraneoplastic pemphigus
4. 自己免疫性原発性卵巣不全（早発卵巣不全）の臨床的特徴および診断 clinical features and diagnosis of autoimmune primary ovarian insufficiency premature ovarian failure
5. 混合性結合組織病における抗U1-RNP抗体 anti u1 rnp antibodies in mixed connective tissue disease

Japanese Journal

全身性強皮症における自己抗体とその臨床的特徴

濱口儒人
日本臨床免疫学会会誌 36(3), 139-147, 2013
… トリオール抗体，抗U1RNP抗体，抗Ku抗体，抗PM-Scl抗体なども頻度は低いながら特徴的な臨床像を有しているため重要な抗体である．SScでみられる自己抗体の頻度には人種差があり，これは自己抗体が特定のHLAと相関していることが一因と考えられている．SScにおける自己抗体の同定は手技の煩雑な免疫沈降法を要するものが多く，ELISA法が利用できる自己抗体は限られている．簡便に測定できる測定法の開発が望まれる． …
NAID 130003364171

P-036 ゲノム中に存在するDNA付加体の免疫沈降法を用いた濃縮法(Adduct-DNA Immunoprecipitation:A-DIP)の開発(I.変異原性・遺伝毒性,ポスターセッション)

大野絢,中野毅,中釜斉,松島芳隆,布柴達男,戸塚ゆ加里
日本環境変異原学会大会プログラム・要旨集 (41), 108, 2012-10-29
NAID 110009616970

P2-078 破骨細胞分化における転写調節因子PU.1とTGF-βシグナルの影響について

石山健太郎,西山千春,八代拓也,田村直人,奥村康,髙崎芳成
日本臨床免疫学会会誌 35(4), 365b-365b, 2012
… 存在下で破骨細胞を分化誘導する過程において，si RNAを用いてPU.1発現をノックダウンした．得られた細胞を，TRAP染色で酵素活性を評価し，定量的PCRにて破骨細胞マーカー遺伝子群のmRNA発現量を測定した．②TGF-βの有無が，PU.1のmRNA発現量に及ぼす影響を定量的PCRにより解析した．③破骨細胞特異的遺伝子のプロモーターに対し，PU.1がTGF-β制御下にどのように作用しているか，クロマチン免疫沈降法を用いて検討した． …
NAID 130003364113

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★リンクテーブル★

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関連記事	「免疫」「沈降」

「免疫共沈降」

　　[★]

英: coimmunoprecipitation、co-immunoprecipitation、coimmunoprecipitate
関: 免疫沈降

「免疫沈殿」

　　[★]

英: immunoprecipitation
関: 免疫沈降、免疫沈降法、免疫沈殿法

「免疫沈殿法」

　　[★]

英: immunoprecipitation
関: 免疫沈降、免疫沈降法、免疫沈殿

「免疫沈降物」

　　[★]

英: immunoprecipitate
関: 免疫沈降

「放射性免疫沈降法」

　　[★]

英: radioimmunoprecipitation assay、RIPA
関: 放射性免疫沈降分析、放射免疫沈降法

「放射性免疫沈降分析」

　　[★]

英: radioimmunoprecipitation assay
関: 放射性免疫沈降法

「放射免疫沈降法」

　　[★]

英

(n

RIPA

関: 放射性免疫沈降法

「免疫」

　　[★]

英: immunity, immune
関: 免疫系

免疫の種類 (PT.246-251)

液性免疫(humoral immunity)と細胞性免疫がある。

	主に関与するリンパ球	働き	リンパ節での局在
細胞免疫	T細胞	(1)免疫の活性化	傍皮質
		(2)抗原を有する細胞への攻撃
液性免疫	B細胞	抗体産生	皮質

T細胞の種類

細胞の種類	補レセプター	抗原を提示する細胞	MHC抗原
キラーT細胞(Tc)	CD8	抗原提示細胞	MHCクラスI
ヘルパーT細胞(Th)	CD4	全ての細胞	MHCクラスII

ヘルパーT細胞の種類

T細胞	関連する因子	産生する物質	機能
Th1	IL-12 　増殖	IL-2,IFN-γなど	細胞性免疫を促進' 　(1)キラーT細胞、NK細胞、マクロファージを活性化　(2)遅延型過敏反応により自己免疫疾患に関与
Th2	IL-4 　Th→Th2	IL-4,IL-5,IL-6,IL-10など	液性免疫を促進' 　(1)B細胞、好酸球、肥満細胞に作用。　(2)即時型アレルギーに関与

「沈降」

　　[★]

英: sedimentation、precipitation、sediment、precipitate
関: 遠心沈降、遠沈、沈降物、沈渣、沈殿、沈殿物、誘起、誘発、降水、降水量、沈澱

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